ACROBiosystems社　CD47関連商品【がん免疫療法のターゲット】|東京未来スタイルは研究用試薬の輸入商社です。

背景製品一覧分析データ

背景

CD47、またはインテグリン関連タンパク質(IAP)は、インテグリンαvβ3の研究を目的とした研究で初めて発見され、細胞膜上のインテグリンαvβ3とシス型の相互作用をすることが判明しました。追従する研究により、すべての細胞型で発現する典型的な「自己マーカー」としてCD47が確立されました。CD47は組織恒常性の重要な調節因子であり、またアテローム性動脈硬化症から癌に至るまで様々な疾患に関与しています。CD47は食細胞の貪食を抑制して宿主細胞を保護します。癌細胞で発現したCD47がNK細胞で発現したSIRPファミリータンパク質のSIRPアルファおよびSIRPガンマと相互作用することは十分に説明されています。そうすることで、CD47は自然免疫応答による排除から癌細胞を保護します。

またCD47は、TSP-1が仲介する血管内の一酸化窒素(NO)シグナル伝達にも不可欠です。 CD47はCD36およびVEGFR2を調節して血管新生を阻害します。NOシグナル伝達の長期調節不全は幾つかの種類の心血管疾患の特徴であり、CD47をアテローム性動脈硬化症研究の約束された標的としています。実際、抗CD47 モノクローナル抗体はいくつかのin vivoモデルにおいてアテローム硬化性負荷（atherosclerotic burden）を軽減することが実証されています。

関連ページ：ACROBiosystems社　二重特異性抗体のターゲット
関連ページ：ACROBiosystems社のご紹介
 

癌および心血管疾患の病因における役割の重要性を考えると、CD47シグナル伝達が新しい標的治療のために深く調査されていることは驚くべきことではありません。ACROBiosystems社は複数のaviタグビオチン化タンパク質を含むユニークなCD47関連製品を迅速なハイスループットスクリーニングのために提供します。以下の商品は中和作用のある化合物のスクリーニングにおけるELISA等に容易に適合させることが可能です。

製品一覧

カタログ番号	製品名
CD7-H5227	Human CD47 Protein, His Tag Hot
CD7-H5256	Human CD47 Protein, Fc Tag (MALS verified) Hot
CD7-H82E9	Biotinylated Human CD47 Protein, His,Avitag™ Hot
CD7-H82F6	Biotinylated Human CD47 Protein, Fc,Avitag™ Hot
CD7-H52A5	Human CD47 Protein, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin Hot
EP-102	CD47: SIRP alpha [Biotinylated] Inhibitor Screening ELISA Assay Pair Hot
CD7-H522a	Human CD47 Protein, His Tag, low endotoxin
CD7-H5251	Human CD47 Protein, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxin
CD7-H82A3	Biotinylated Human CD47 Protein, Mouse IgG2a Fc,Avitag™
CD7-H82F8	Biotinylated Human CD47 Protein, Fc (L234A, L235A, P329G),Avitag™
CD7-HA2E9	Unconjugated Human CD47 Protein, His,Avitag™
CD7-HF2H3	FITC-Labeled Human CD47 Protein, His Tag
CD7-M522b	Mouse CD47 Protein, His Tag
CD7-M5251	Mouse CD47 Protein, Fc Tag
CD7-M525a	Mouse CD47 Protein, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin
CD7-M82E4	Biotinylated Mouse CD47 Protein, His,Avitag™
CD7-R5256	Rat CD47 Protein, Fc Tag
CD7-R5257	Rabbit CD47 Protein, Fc Tag
CD7-C5252	Cynomolgus / Rhesus macaque CD47 Protein, Fc Tag
CD7-C52H1	Cynomolgus / Rhesus macaque CD47 Protein, His Tag
CD7-C52H5	Canine CD47 Protein, His Tag
CDA-H82F2	Biotinylated Human SIRP alpha / CD172a Protein, Fc,Avitag™ (MALS verified)
SIA-H5225	Human SIRP alpha / CD172a Protein, His Tag (MALS verified)
SIA-H5251	Human SIRP alpha / CD172a Protein, Fc Tag (MALS verified)
SIA-H52A8	Human SIRP alpha / CD172a Protein, Mouse IgG1 Fc Tag (MALS verified)
SIA-H82A3	Biotinylated Human SIRP alpha / CD172a Protein, Mouse IgG2a Fc,Avitag™
SIA-H82E0	Biotinylated Human SIRP alpha / CD172a Protein, His,Avitag™ (MALS verified)
SIA-HP252	PE-Labeled Human SIRP alpha / CD172a Protein, Fc Tag (recommended for neutralizing assay)
SIA-M5252	Mouse SIRP alpha / CD172a Protein, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin
SIA-M5258	Mouse SIRP alpha / CD172a Protein, Fc Tag
SIA-M52H4	Mouse SIRP alpha / CD172a Protein, His Tag
SIA-C5254	Cynomolgus SIRP alpha / CD172a Protein, Fc Tag
SIA-C52H7	Cynomolgus SIRP alpha / CD172a Protein, His Tag
SIA-H5257	Human SIRP beta / CD172b Protein, Fc Tag
SIG-H5253	Human SIRP gamma / CD172g Protein, Fc Tag

Acrobiosystems社の二重特異性抗体製品リストはこちら↓

CD3	CD19	CD20	CD38
CD40	CD47	IL-3 R alpha	Her2
ErbB3	LAG-3	4-1BB	PD-1
PD-L1	CTLA-4	TIM-3	EpCAM
EGF R	BCMA	PSMA	HGF R
ROR1	VEGF R2	FAP	IL-1 beta
IL-4	IL-6 R alpha	IL-13	IL-17A
CD16	TNF-alpha	ANGTP2	OX40
ICOS	HGF	B7-H3	TGF-beta 1
LRP-5	LRP-6	CEACAM-5	Mucin-1

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分析データ

HPLCで示された高い均質性

Human CD47, Fc Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 CD7-H5256)の純度はSEC-HPLCで90％以上と判断されました。

CD47のSIRP-α結合性の検証

ELISA生理活性測定:CD47のSIRP-α結合性	BLI生理活性測定:CD47のSIRP-α結合性
固定化したHuman SIRP alpha, His Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 SIA-H5225) 2 μg/mL (100 μL/well)は、Biotinylated Human CD47, Fc,Avitag (カタログ番号 CD7-H82F6)と結合し、8-250 ng/mLの濃度で線形の相関を示しました。	AHC (Anti-human IgG Fc Capture) バイオセンサーに固定化したHuman CD47, Fc Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 CD7-H5256)は、Human SIRP alpha, His Tag (HPLC-verified)(カタログ番号 SIA-H5225)と結合しました。BLI（バイオレイヤー干渉法）アッセイ(ForteBio Octet Red96e)により、結合定数は0.72 μMと測定されました。
細胞ベースアッセイ:CD47とSIRP-α発現ACHN細胞の結合性
FACSアッセイにおいてHuman CD47, Fc Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 CD7-H5256)は、SIRP-αを発現するACHN細胞(ヒト腎癌由来細胞株)と結合しました。使用したCD47の濃度は10 ug/mLです。

抗体スクリーニングへのCD47の応用

抗体結合検査

ELISA生理活性測定:CD47の抗CD47抗体結合性
固定化したヒトIgG4抗CD47モノクローナル抗体(2 μg/mL, 100 μL/well)はBiotinylated Human CD47, His,Avitag (カタログ番号 CD7-H82E9)と結合し、0.05-2 ng/mLの範囲で線形の相関を示しました。
SPR/BLI生理活性測定:CD47の抗CD47抗体結合性
CM5チップ上に、抗ヒトIgG Fc抗体を介して固定化された抗ヒトCD47モノクローナル抗体(ヒトIgG4)は、Human CD47, His Tag (カタログ番号 CD7-H5227)と結合しました。SPRアッセイ(Biacore T200)では結合定数は1.66 nMを示しました。	AHCバイオセンサーに固定化したImmobilized Human CD47, Fc Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 CD7-H5256)は、Human SIRP alpha, His Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 SIA-H5225) (HPLC検証済み)と結合しました。BLIアッセイ(ForteBio Octet Red96e)では結合定数は0.72 μMを示しました。

中和抗体スクリーニングへの応用

抗ヒトCD47中和抗体の連続希釈液をHuman SIRP alpha, His Tag (HPLC-verified) (カタログ番号 SIA-H5225)に加えました。： Biotinylated Human CD47, Fc,Avitag (カタログ番号 CD7-H82F6)の結合反応を確認しました。50％阻害濃度(IC50)は124.5 ng/mLでした。	FACS分析により、SIRP-αを発現しているACHN（ヒト腎癌由来細胞株）へのヒトCD47の結合が、SIRP-α中和抗体の濃度上昇に伴って阻害されることが示されました(IC50=15.02 μg/mL)。使用されたヒトCD47の濃度は10 μg/mLでした。

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